1,25(OH)₂ 디하이드록시비타민 D 및 24,25(OH)₂ 디하이드록시비타민 D(1,25(OH)2 di-hydroxyvitamin D and 24,25(OH)2 di-hydroxyvitamin D)와 같은 많은 비타민 D 대사체는 쉽게 이온화되는 작용기를 갖고 있지 않고 농도가 낮기 때문에 감도 확보가 어렵습니다. 아래와 같이, 앞서 언급한 비타민 D 분석물 표준 용액을 microflow LC/MS/MS로 분석한 결과, semi-microflow 분석과 비교했을 때 신호 대 잡음비(signal-to-noise ratio, S/N)가 3~5배 향상되었습니다.
Nexera Mikros - Features
Supporting Micro Flowrate Range Liquid Chromatography Mass Spectrometry System
Microflow로 향상된 검출 한계
높은 바이오 분석 감도
semi-microflow와 비교할 때, microflow LC/MS/MS를 사용하면 Verapamil의 신호 대 잡음비(signal-to-noise ratio, S/N)가 5배 향상되고, Nor-Verapamil의 신호 대 잡음비도 4배 향상되었습니다.
Monoclonal Antibody 바이오 분석
- Nexera™ Mikros 및 nSMOL™ Antibody BA Kit -
nSMOL(nano-surface and molecular orientation limited proteolysis)은 고유의 혁신적인 기술로, 트립신이 고정화된 나노입자를 이용하여 항체의 Fab 영역을 선택적으로 단백질 분해할 수 있게 합니다. Fab 유래 펩타이드는 고감도 질량분석기를 사용한 MRM 측정을 통해 정량됩니다. Nexera Mikros 시스템은 기존 유속 대비 신호 강도가 12배 향상되었으며, 검출 한계는 0.025 μg/mL로 낮고, 선형성도 우수합니다. Nexera Mikros 시스템은 LC/MS를 이용한 저농도 펩타이드 정량에 이상적입니다.
다음은 혈장 내 항체 의약품 분석의 예시입니다. 트라스투주맙을 첨가한 혈장은 nSMOL 항체 BA 키트를 사용하여 전처리되었습니다.
트라스투주맙에서 유래한 시그니처 펩타이드 분석에서 Nexera Mikros는 0.00763~62.5 μg/mL의 동적 범위, R² > 0.99의 우수한 선형성, 평균 101.0%의 뛰어난 정확도를 제공합니다.
트라스투주맙 유래 펩타이드(trastuzumab-derived-peptide) 분석의 일내 재현성(intra-day reproducibility)은 아래 표에 요약되어 있습니다.
결과를 보면, LLOQ에서 정확도와 정밀도가 모두 20% 이내이며, 다른 농도에서도 15% 이내로 우수한 재현성을 나타냅니다.
QC 시료를 이용하 일내 재현성 평가 결과
*1: 해당 곡선은 로그 스케일로 작성되었습니다.
*2: QC 세트 1과 2는 2일에 걸쳐 분석되었으며, 각 농도 세트는 다섯 번씩 분석되었습니다.
비교할 수 없는 Micro flow 견고성
HPLC의 견고함과 안정성을 유지하면서 Microflow의 이점을 실현
Nexera Mikros 시스템은 HPLC의 견고성을 갖춘 저유량 시스템에서 기대할 수 있는 개선 효과를 제공합니다. 플라즈마 블랭크를 단백질 침전, 희석(3배)하고 1,500회 연속으로 주입했습니다. 연속적으로 주입하는 동안 QC 샘플(nortriptyline40ppt)을 플라즈마 블랭크 50회 주사할 때마다 한 번씩 주입했습니다. QC 샘플의 피크 면적과 유지 시간은 아래에 표시되어 있습니다. 4.38%의 RSD 면적 반복성과 0.25%의 RSD 유지 시간 안정성으로 복잡한 행렬의 고처리량 분석에서 흔히 볼 수 있는 피크 형상 손실 없이 매우 안정적인 작동이 입증되었습니다.
간편하고 쉬운 조작
견고하고 사용이 편리한 Microflow ESI 소스
Micro-ESI™ 소스
Shimadzu의 Micro-ESI LC/MS 소스는 최적의 감도와 사용 편의성을 위해 설계되었습니다. X–Y 조절 스테이지와 관찰용 카메라를 통해 ESI 스프레이 니들의 조정이 용이합니다. 컬럼 오븐은 LC/MS에 장착되어 컬럼 출구와 ESI 니들 간의 부피를 최소화합니다.
Micro-ESI probe microflow 유속에 최적화된 ESI 스프레이 각도를 갖추고 있으며, 각각 삼중 사중극자 질량분석기(triple quadrupole mass spectrometry)와 사중극자 비행시간 질량분석기(quadrupole time-of-flight mass spectrometry)에 사용할 수 있습니다.
CTO-Mikros™ + UF-Link™: 쉽고 신뢰할 수 있는 컬럼 설치
Micro-ESI 소스에 장착된 CTO-Mikros 컬럼 오븐은 안정적인 컬럼 온도를 유지하여 머무름 시간 재현성을 보장하며, 최대 150 mm 길이의 컬럼을 수용할 수 있습니다. 최적의 소스 조정을 유지하기 위해 CTO-Mikros에는 혁신적인 스냅인 컬럼 고정 시스템인 UF-Link가 적용되어 있습니다.
microflow 유속을 사용할 때, 작은 데드 볼륨도 확산을 일으켜 피크 형태와 감도 손실을 초래할 수 있습니다. Shimadzu의 UF-Link를 사용하면 누구나 ESI 스프레이 니들 위치를 방해하지 않고 microflow 컬럼을 올바르게 설치할 수 있습니다. 확실히 밀폐되는 어댑터를 통해 컬럼을 오븐에 고정하고 ESI 니들과 제로 데드 볼륨 연결을 만들 수 있습니다. 표준 피팅을 갖춘 최대 150 mm 길이의 컬럼까지 설치가 가능합니다.
연결 과정
-
.png)
어댑터를 컬럼에 장착합니다.
어댑터의 표준 나사는 다양한 컬럼과 호환됩니다. -
.png)
컬럼을 오븐 내부의 UF-Link 메커니즘에 장착합니다.
-
레버를 회전시켜 연결을 완료합니다.
LC-Mikros™: 혁신적인 Microflow 펌프 설계
Shimadzu LC 펌프는 긴 수명과 높은 성능으로 업계 표준을 자랑합니다. LC-Mikros 용매 전달 펌프는 완전히 새로운 직결 구동(direct-drive) 설계로 1~500 μL/min 범위의 microflow에서 semi-microflow 유속을 제공합니다. UHPLC 시스템의 최대 압력 허용치 80 MPa(11,600 psi)는 모든 컬럼 유형의 사용을 가능하게 합니다.
LC-Mikros 펌프는 microflow 그래디언트 용출을 위해 설계되었습니다. 아래 예시에서는 1%에서 90%까지의 이동상 조성을 사용한 우수한 그래디언트 안정성을 보여줍니다. LC-Mikros는 크로마토그래피 분석에 필수적인 안정적인 머무름 시간을 제공합니다.
SIL-40C XR: Low-Volume Direct Injection 오토샘플러
SIL-40C XR 오토샘플러는 뛰어난 정확성과 재현성, 그리고 극히 낮은 캐리오버를 제공합니다. 주입 부피 범위는 0.1~50 μL이며, SIL-40C XR이 채택한 전량 주입 방식(total injection method)으로 인해 소중한 시료가 낭비되지 않습니다.
1 μL 미만의 저주입 부피를 사용할 때에도 높은 정확도의 결과를 제공합니다. 좁은 컬럼에서 micro flow를 사용할 경우 최적의 주입 부피는 더욱 낮아지며, 특히 용출력이 높은 시료 용매를 사용할 경우에는 주입 부피를 늘리기 어렵습니다. 이 경우 시료 용매의 용출력을 약화시키기 위해 시료를 희석해야 하지만, SIL-40C XR의 고정밀 소량 주입 기능은 고유기 용매 함량의 시료를 희석 없이도 사용할 수 있게 합니다.또한, 새롭게 개발된 “프programmable loop cut-off mechanism”은 시료가 니들에서 배출되는 즉시 고압 밸브를 이용해 샘플 루프를 유로에서 자동 분리하여 시스템 부피와 그래디언트 지연을 최소화합니다. 이는 microflow 분석의 런타임을 줄이는 데 매우 중요한 기능입니다.
Downloads
Download the latest brochure.